Grazie al servizio di Amplificazione del DNA è possibile richiedere ai nostri laboratori la realizzazione e/o messa a punto di PCR.
Sono previste due opzioni:
1. Progettazione e sintesi degli oligonucleotidi a cura del cliente.
2. Progettazione e sintesi dei relativi oligonucleotidi a cura del servizio.
Oltre alla scelta dell'opzione desiderata, per usufruire del servizio, ciò che ci occorre è:
- Mappa in formato elettronico del DNA con l'indicazione del target da amplificare;
- Taglia degli ampliconi;
- Programma/protocollo di PCR con indicazione delle T di lavoro e n° di cicli;
- Sequenza Tm degli oligonucleotidi usati (valido per l'opzione 1)
- Immagine della corsa elettroforetica di controllo del materiale inviato come templato per la PCR;
- Informazione sul tipo di polimerasi da utilizzare a scelta tra: Taq Polimerasi (PromegaGoTaq) e/o Pfu Polimerasi (Finnzyme Phusion® High-Fidelity DNA Polymerase)
Inoltre, è necessario inviare:
- DNA templato in provetta da 0,2 ml (quantità minima richiesta 500 ng);
- Oligonucleotidi alla concentrazione di 100 pmoli/µl.
Questa tecnica può essere associata ad altri servizi come:
- Clonaggi: il frammento ottenuto può essere clonato, controllato tramite sequenziamento e utilizzato per ottenere diversi quantitativi di DNA plasmidico (midi o maxi).
- Sequenziamento: il frammento prodotto può essere sequenziato, sia con i relativi oligo utilizzati per la reazione di PCR che con altri oligo a richiesta. Gli oligo verranno conservati nella
banca oligo personale.
- Genotipizzazione: il frammento ottenuto può essere analizzato al sequenziatore per caratterizzar individui, diagnosticare mutazioni o individuare transgeni.
Tutto quello che dovrai fare è inviare il materiale da amplificare con le relative informazioni.... al resto ci pensiamo noi. laboratori@biofabresearch.it
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