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Estrazione del DNA plasmidico
 

Questo servizio prevedere l'estrazione di Dna plasmidico da crescite batteriche con diversi recuperi quantitativi.

Le tre preparazioni possibili sono:

Mini con un range di recupero compreso tra 1- 1.5µg
Midi con un range di recupero compreso tra 50 -100 µg
Maxi con un range di recupero compreso tra 0.5 -1 mg

Il servizio prevede:

  • trasformazione se richiesta
  • inoculo del materiale da estrarre
  • estrazione e purificazione del Dna plasmidico con utilizzo di colonne di affinita’(matrici di silice)
  • controllo qualitativo del materiale ottenuto su gel di agarosio
  • invio della relativa foto
  • quantificazione spettrofotometrica del Dna
  • spedizione del materiale ottenuto
  • consegna in 48 ore

A richiesta e’ possibile anche associare il servizio agli altri progetti di sequenziamento e potrai usufruire della
banca oligo personale.

Estrazione del DNA Plasmidico
 
Come preparare i campioni da inviare
 

Colonia

Spedire:

  1. Stab-agar (LB Agar senza antibiotico) a temperatura ambiente
  2. Glicerolato (100 µl della tua crescita in 50 µl di glicerolo al 50%)

Consigliamo di utilizzare:

  • idonee vial di vetro identificate con numero progressivo
  • Piastra da 96 pozzetti con tappi ermetici e relativo schema di identificazione in formato Excel .


Si consiglia di usare ceppi batterici Rec- e EndA- per es.: XL1-Blue; DH1; DH5a; JM109; SRB; XLO

Estrazione del DNA Plasmidico
 
DNA

Inviare a T.A. circa 20ng di DNA in provetta.

 
NB indicare in entrambi i casi la resistenza all’antibiotico e l’eventuale uso di plasmidi low copy (meno resa). Evitare inoculi da piastre che sono state conservate per molto tempo perché possono provocare mutazioni o la perdita del plasmide
 
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